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培养考察情况(收集5篇)

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培养考察情况篇1

入党积极分子,主要是指那些已经向党组织正式提出入党申请,经党小组(共青团员经团组织)推荐、支部委员会或支部大会研究确定作为发展对象进行有计划培养的人员。

对入党积极分子进行培养和教育

党组织对入党积极分子的培养、教育工作,要有组织、有计划地进行。要密切结合积极分子的思想、工作实际循序渐进,坚持经常。培养教育方法要切实可行,形式要生动活泼。具体方法是:

(2)吸收入党积极分子听党课,参观革命纪念地,请先进模范人物作报告,参加讨论发展党员的支部大会和入党宣誓仪式以及党内组织的一些有教育意义的活动。

(3)为入党积极分子提供接受锻炼和考验的机会,给他们分配一定的社会工作,并检查他们完成工作的情况。

(4)要求入党积极分子经常向党组织汇报自己的思想和工作情况,党组织定期对他们的表现进行考察,肯定成绩,指出不足和努力方向。

(5)有针对性地采取多种形式对他们进行培训。为了切实做好对入党积极分子的培养、教育工作,党组织要建立和健全一系列行之有效的培养、教育制度,不断总结经验,使培养、教育入党积极分子的工作逐步制度化和规范化。入党积极分子的培养联系人的主要任务是什么?

入党积极分子培养联系人的主要任务是:

(1)了解入党积极分子的思想和学习、工作等情况,向党组织反映他们的愿望和要求,以自己的实际行动向入党积极分子言传身教,鼓励和帮助他们积极上进,端正入党动机。

(2)经常向党支部、党小组汇报入党积极分子的成长情况,并根据入党积极分子的思想认识和实际表现,提出加强培养、教育的措施和意见。

培养考察情况篇2

对入党积极分子进行培养和教育

党组织对入党积极分子的培养、教育工作,要有组织、有计划地进行。要密切结合积极分子的思想、工作实际循序渐进,坚持经常。培养教育方法要切实可行,形式要生动活泼。具体方法是:

(1)党支部指定1-2名正式党员做入党积极分子的培养联系人,对他们进行个别帮助。

(2)吸收入党积极分子听党课,参观革命纪念地,请先进模范人物作报告,参加讨论发展党员的支部大会和入党宣誓仪式以及党内组织的一些有教育意义的活动。

(3)为入党积极分子提供接受锻炼和考验的机会,给他们分配一定的社会工作,并检查他们完成工作的情况。

(4)要求入党积极分子经常向党组织汇报自己的思想和工作情况,党组织定期对他们的表现进行考察,肯定成绩,指出不足和努力方向。

(5)有针对性地采取多种形式对他们进行培训。为了切实做好对入党积极分子的培养、教育工作,党组织要建立和健全一系列行之有效的培养、教育制度,不断总结经验,使培养、教育入党积极分子的工作逐步制度化和规范化。入党积极分子的培养联系人的主要任务是什么?

入党积极分子培养联系人的主要任务是:

(1)了解入党积极分子的思想和学习、工作等情况,向党组织反映他们的愿望和要求,以自己的实际行动向入党积极分子言传身教,鼓励和帮助他们积极上进,端正入党动机。

(2)经常向党支部、党小组汇报入党积极分子的成长情况,并根据入党积极分子的思想认识和实际表现,提出加强培养、教育的措施和意见。版权所有

培养考察情况篇3

入党积极分子在接受培养期间,党组织应当指定一至两名正式党员作其培养联系人。培养联系人每季度应对入党积极分子学习、工作以及思想变化情况进行考察,党支部每半年对入党积极分子进行一次考察。高中作文网www.gaozhongzuowen.net网站编辑为你收集的关于入党申请相关材料资料。提供参考,欢迎参阅。

材料一

为了认真贯彻中央提出的“控制总量、优化结构、提高质量、发挥作用发展党员总要求,切实做好全县发展党员工作,根据《中国共产党发展党员工作细则》,特制定本制度。

一、民主推荐制度

党支部在入党申请人中确定入党积极分子,必须经过民主推荐,民主推荐每半年或一年一次,应当采取党员推荐、群团组织推优等方式产生人选,由支部委员会(不设支部委员会的由支部大会)研究表决决定。

入党积极分子推荐情况应记入《入党积极分子推荐表》,并存入党员档案。

二、培养考察制度

一是入党积极分子的培养考察。入党积极分子在接受培养期间,党组织应当指定一至两名正式党员作其培养联系人。培养联系人每季度应对入党积极分子学习、工作以及思想变化情况进行考察,党支部每半年对入党积极分子进行一次考察。考察评定意见记入《入党积极分子培养考察表》。

二是入党发展对象的培训教育。基层党委或县级党委组织部门应当对发展对象进行短期集中培训。培训时间一般不少于三天(或不少于二十四个学时)。培训内容主要以学习党章、《关于党内政治生活的若干准则》等文件为主。中央组织部组织编写的《入党培训教材》,可以作为学习辅导材料。未经培训的,除个别特殊情况外,不能发展入党。培训情况记入《入党发展对象培训登记表》。

三是预备党员的培养考察。党组织应当及时将上级党委审查批准的预备党员编入党支部和党小组,对预备党员继续进行教育和考察。预备党员必须面向党旗进行入党宣誓。入党宣誓仪式,一般由基层党委或党支部(党总支)组织进行。党组织应当通过党的组织生活、听取本人汇报、个别谈心、集中培训、实践锻炼等方式,对预备党员进行教育和考察。培养联系人应作为预备党员的入党介绍人,继续对预备党员进行教育考察。入党介绍人每季度对预备党员学习、工作以及思想变化情况进行考察,指出不足并提出改进意见。党支部每半年对预备党员进行一次考察,考察评定意见记入《预备党员考察登记表》。

入党积极分子、入党发展对象、预备党员的培养考察以及培训资料应存入党员档案。

三、备案预审制度

发展党员全程要经过三次备案、一次预审。

一是确定入党积极分子报上级党委备案。入党申请人经过“两推一票决(党员推荐、群团组织推优,支委会票决)确定为入党积极分子后,报上级党委备案。

二是确定发展对象报上级党委备案。入党积极分子经过一年以上培养教育和考察、基本具备党员条件的,在听取党小组、培养联系人、党员和群众意见的基础上,支部委员会讨论同意并报上级党委备案后,可列为发展对象。

基层党委备案时,应在《入党积极分子培养考察表》相应栏目签注意见,并加盖备案章。

三是发展对象报具有审批权限的基层党委预审。支委会应当对发展对象进行严格审查,经集体讨论认为合格后,报具有审批权限的基层党委预审。基层党委对发展对象的条件、培养教育情况等进行审查,根据需要听取执纪执法等相关部门的意见。审查结果以书面形式通知党支部,并向审查合格的发展对象发放《中国共产党入党志愿书》。经基层党委预审合格的发展对象,由支部委员会提交支部大会讨论。支委会审查意见、党支部申报意见、基层党委预审意见以及支委会讨论意见,要记入《预备党员考察登记表》。

四是党委审批预备党员后报上级党委组织部门备案。预备党员必须由有审批权限的党(工)委审批。乡镇党委所属的基层党委、党总支、党组不能审批预备党员。党委要及时将审批预备党员情况报县委组织部备案。未经县委组织部备案的预备党员将不能录入全国党员管理信息系统。

四、政治审查制度

党组织必须对发展对象进行政治审查。

政治审查的主要内容是:对党的理论和路线方针政治的态度;政治历史和重大政治斗争中的表现;遵纪守法和遵守社会公德情况;直系亲属和与本人关系密切的主要社会关系的政治情况。政治审查的基本方法是:同本人谈话、查阅有关档案资料、找有关单位和人员了解情况以及必要的函调或外调。对流动人员中的发展对象进行政治审查时,还应当征求其户籍所在地和居住地基层党组织的意见。审查情况应当形成结论性的综合政治审查报告。综合政治审查报告应存入党员档案。凡是未经政治审查或政治审查不合格的,不能发展入党。

五、公示制度

发展党员要进行两次公示。

1)经党的支部委员会确定,拟提交支部大会讨论接收为预备党员的发展对象;

2)预备期满,经党的支部委员会审查,拟提交支部大会讨论转为正式党员的预备党员。

公示内容为:

1)拟接收为预备党员的发展对象的公示内容:姓名、性别、出生年月、学历和学位、政治面貌、现工作单位及职务(职称)、申请入党时间和被列为入党积极分子时间和近两年受奖惩情况。

2)拟转为正式党员的预备党员的公示内容:姓名、性别、出生年月、学历和学位、政治面貌、现工作单位及职务(职称)、被批准为预备党员的时间和预备期内受奖惩情况。

3)公示的期限、要求和联系电话等。

公示时间:一般为7个工作日。

公示形式和范围:公示由审批党员的基层党委或经授权审批党员的党总支部负责。公示采用张榜公布等形式进行。要根据公示对象所在单位(部门和行业)的特点,以实效性、广泛性和便于群众监督为原则进行公示。公示范围一般为公示对象工作的基层单位。如有必要也可扩大公示范围。

公示程序:

1)党支部向负责审批党员的上级党组织报送拟接受为预备党员或拟转为正式党员对象的有关材料,提供基本情况公示表。

2)负责审批党员的上级党组织审定拟接受为预备党员或拟转为正式党员对象的基本情况公示表,确定监督电话和联系人,到公示对象所在单位进行公示。经公示未发现问题的,负责公示的上级党组织须及时指导党支部召开支部大会讨论研究,按有关程序及时办理入党手续。

3)对反映有问题的公示对象,党支部要指定专人(2人以上)进行调查核实,并及时向公示对象所在单位党支部通报调查核实的情况。对经调查确有问题的公示对象,应视问题性质和轻重分别提出暂缓审批、不予批准入党或延长预备期、取消预备党员资格的意见。对群众反映违反规定不按程序发展党员且情况属实的基层党组织,上级党组织要责令其及时纠正。

在公示期内,任何单位和个人均可采用电话、信函或直接来访的形式,向负责公示的党组织反映公示对象在政治立场、理想信念、思想品德、入党动机、工作表现、廉洁自律和遵纪守法等方面的情况,同时也可反映基层党组织在发展党员工作中坚持党员标准和发展党员工作程序等方面的情况。反映问题要求实事求是,客观公正。

六、票决制度

发展党员要经过两次票决。

1)支部大会讨论接收发展对象为预备党员时要进行票决。

2)支部大会讨论预备党员转为正式党员时要进行票决。

发展党员票决办法:

1)票决表决票由各基层党委统一印制,在支部党员大会召开时间确定后,党支部按支部党员人数登记领取。支部大会票决时,必须有半数以上有选举权和表决权的正式党员出席,如果出席人数未超过半数,不得进行票决;有表决权的与会党员以无记名方式进行票决;赞成票只有超过应到会有表决权党员的半数(因故不能到会的有表决权的正式党员,会前向支部大会提出书面意见的,应统计在有效票数内),才能通过接收预备党员或预备党员转为正式党员的决议。讨论两人以上发展对象入党或预备党员转正时,应逐个进行讨论,一并投票票决,分别记票、汇总。

发展党员票决程序:

1)党支部负责人对票决提出要求,并介绍发展对象或预备党员转正申请人的基本情况;

2)申请人宣读“入党申请书、《入党志愿书》或“转正申请书;

3)支委会向大会报告对申请人审查和公示情况;

4)介绍人和考察培养人通报考察培养情况,并发表个人对其入党的意见;

5)与会党员发表对其入党或转正的意见;

6)清点到会人数,核实有表决权党员人数并分发表决票;

7)投票,现场唱票计票,公布表决结果。

票决结束后,表决票由党组织加盖公章后封存备查,表决结果填入本人入党志愿书,连同本人入党申请书、培养教育和考察材料、公示情况等报上级党委审批。票决未通过的对象,由党支部重新按照程序考察,待考察对象条件成熟后,再提交支部党员大会讨论表决。

七、全程记实制度

党支部在发展党员过程中,对主动申请入党的积极分子,从递交第一份入党申请书开始,到按期转为正式党员为止,必须按照时间先后顺序,以写实的方式,对发展党员五个阶段、二十五个环节的信息据实摘要进行记录,如实填写《发展党员工作全程纪实表》。《发展党员工作全程纪实表》一式两份,一份存入党员档案,一份由党员所在党支部备存。入党积极分子、发展对象或预备党员工作调动时,《发展党员工作全程纪实表》应及时转交给调入单位党组织。

八、检查报告制度

各乡镇党委、县直各党(工)委每年在上报当年党员年报时,一并上报本年度发展党员工作总结。工作总结要以党委正式文件上报,报告中分三部分撰写,一是本年度发展党员的主要做法及发展计划完成情况;二是本党委党员队伍结构分析以及发展党员工作中存在的突出问题;三是次年发展党员工作计划和工作措施。县委组织部每半年对全县各党(工)委发展党员工作进行督查检查,并通报检查结果。年终要向县委和市委组织部报告发展党员工作情况、发展党员工作计划、违纪违规发展党员等问题的查处情况。对违反程序发展党员的,应视情节轻重,给予相关责任人诫勉谈话、批评、通报批评、党纪处分等相应处理。

材料二

申请可分为口头申请和书面申请两种形式。除非不具备必要的条件和能力,一般应采取书面申请的形式;有的同志口头提出入党申请后,事后也应补写书面入党申请。入党申请书标志着申请人经过了郑重思考,向党组织表明自己有入党的志愿和要求,使党组织了解申请人的政治信仰和追求,便于党组织对申请人有针对性地进行培养、教育、考察,同时也是党组织确定入党积极分子和发展对象的重要依据。入党申请书是要求入党的同志对党的认识和自我认识的反映。通常情况下,申请入党的同志应写书面申请。

入党申请书的基本书写格式及内容通常如下:

1.标题:居中写“入党申请书。

2.称谓:即申请人对党组织的称呼,一般写“敬爱的党组织。顶格书写在标题的下一行,后面加冒号。

3.正文。

主要内容包括:

(1)对党的认识、入党动机和对待入党的态度。写这部分时应表明自己的入党愿望。

(2)个人在政治、思想、学习、工作等方面的主要表现情况。

(3)今后努力方向以及如何以实际行动争取入党。

4.结尾。申请书的结尾主要表达清党组织考察的心情和愿望,一般用“请党组织在实践中考验我或“请党组织看我的实际行动等作为结束语。全文的结尾一般用“此致,敬礼。在申请书的最后,要署名和注明申请日期。一般居右书写“申请人×××,下一行写上“××年×月×日。

另外,为了使党组织对自己有较全面的了解,申请人可另写一个附加材料,将个人的履历,家庭成员及主要社会关系的情况写清楚。将自己的政治历史情况和奖惩情况也要写清楚。如果自己家庭成员和主要社会关系中,有人政治历史情况比较复杂,或受过刑事或其它重大处分,也应实事求是地写出。

入党申请书内容主要包括以下几个方面:

1、为什么要入党。主要写自己对党的认识和入党动机;要明确表示:我志愿加入中国共产党,承认党的纲领和章程,履行党员义务,执行党的决议,严守党的纪律,保守党的机密,按时交纳党费,对党忠诚,愿意参加党的一个组织并在其中积极工作,为共产主义奋斗终身。

2、表明对党的性质、宗旨、指导思想、奋斗目标、组织原则、纪律和党的路线、方针、政策及党风方面的认识和态度。

3、自己的政治信念和思想、工作、学习、作风等方面的主要情况;要剖析自身存在的不足,表明对入党的态度和决心,以及今后如何以实际行动争取入党。并明确表示愿意接受党组织对自己的教育和考察。

写入党申请书应注意的问题:

1.要认真学习党章,掌握基本精神,加深对党的性质、宗旨、任务、党员的权利、义务等基本知识的理解。

2.要联系自己的思想实际谈对党的认识和入党动机,不要以旁观者身分一味评论别人。

3.对党忠诚者实,向党组织反映真实思想情况。

培养考察情况篇4

Keywords:highervocationalcollege;Partymemberactivists;practicejob

中图分类号:G621文献标识码:A文章编号:1006-4311(2014)29-0264-02

0引言

近年来,随着众多中专校向高职院的升格,高校发展党员计划数的急剧缩减,如何加强和改进对学生入党积极分子的教育培养考察作为一个课题摆在了各院校党组织面前。同时,由于中专院校的基础工作比较薄弱,离高校党建工作的要求还有较大差距。近两年,笔者所在系通过不断的尝试与探索,在系部建立了积极分子实践岗位培养考察模式,并取得了良好的效果。

1高职院党建工作中存在的困难和问题

由于高职院的培养目标、学制等与普通高校不同,所以高职院学生党建工作具有特殊性。

1.1高校党员发展计划数锐减中央明确要求,未来10年,全国党员数量年均净增1.5%作用,到2023年全国党员数量控制在9600万名左右。江苏省委要求,在2015年前,完成年均净增1.3%的调控目标。按照中央、省委要求,2014年在宁高校发展党员计划总数要比2013年减少28%。2014年省委教育工委下达我校计划发展党员70人,而在2013年和2012年这个数据分别是100和400。党员发展数量的锐减使得高职党建工作面临新的挑战。

1.2高职院从事党建工作的专职人员比较缺乏,兼职人员的工作量很大目前高职院党建工作的现状是:多数系部的专职党建工作者没有配备到位,主要依靠党员老师来兼任。但是党员老师们都有自己繁重的教学、科研和社会服务任务,无法抽出过多的精力参与和协助学生党建工作,使得高职院党建工作无法得到人员保障。

1.3对入党积极分子的教育形式相对单一,教育效果不尽理想高职院的学生成长经历和思想状况各不相同,应当有针对性的采用多样化的教育形式以达到更有效率的教育效果。目前高职院普遍采用的是集中学习、交流或者自学的形式对入党积极分子进行教育。这样的教育形式效果不理想,多数学生都以应试的心态来面对,阶段性的学习结束后,很快就将所学知识忘记,无法实现知识的巩固,更遑论提高了。

2设立积极分子实践岗位进行教育培养考察,发挥积极分子应有的作用

由于高校党员数的锐减,使得入党积极分子在党建工作中有更加重要的地位和作用,对积极分子本身也提出了更高的要求。由于高职院党建工作者的配备等方面的限制,多数入党积极分子接受的教育和培养形式单一,无法满足新形势下的高要求。为提高学生入党积极分子的综合素质和水平,结合预备党员教育培养考察机制,南京化工职业技术学院化学工程系党总支在长期的学生党建工作中逐步摸索出一条以设立积极分子实践岗位对学生进行教育培养考察的方法。

虽然入党积极分子有自己的培养考察老师,但是由于学生的自觉性不够高,与各自考察老师的沟通不畅,党员老师自身的工作又非常繁忙,导致对积极分子的教育考察培养不到位。这些,都迫使系部重新思考此项工作的有效性。出于以上考虑,系部在认真分析研究的基础上,及时进行调整,提出了系部党建工作的总体思路:确定对象、集中培养、加强考察。在此基础上设立了积极分子实践岗位。

结合积极分子教育培养考察工作实际,通过工作实践将党的基础理论知识和社会主义核心价值观固化到入党积极分子心中,紧紧围绕“加强过程性、常规化管理”这个目标,根据每位入党积极分子所在的专业,为其提供具体的实践考察岗位。此次定岗紧密结合社会主义核心价值观教育的主旨和系部积极分子培养、教育、考察的工作实际,通过工作实践将党的基础理论知识、社会主义核心价值观固化到入党积极分子心中,紧紧围绕“加强过程性、常规化管理”这个目标,根据每位积极分子的专业情况,为其提供具体的实践考察岗位。

这次活动改变了以往单一、低效、只注重结果的考核体制,改进了考核方式和考核频率,制定出了便于检查、统计、考核的工作安排及考核表,由培养人和岗位负责老师共同考察。量化的考核体现在制定考核表对积极分子进行考核。考核表分为积极分子工作量登记表(学生保管)和积极分子实绩统计表(岗位负责老师保管)。每次工作完成,岗位负责老师需在“学生积极分子工作量登记表”上签字认定其工作,并在自己的“学生积极分子工作实绩统计表”上对该积极分子的工作质量给出评定。每周学生积极分子要到组织干事处登记实践情况,组织干事根据从岗位负责老师处回收的一周以来的“学生积极分子工作实绩统计表”核对准确性,并做好记录,积极分子一个月进行一次总结;积极分子的义务劳动统计表由组织干事根据每周的统计统一填写并签字盖章认定;组织干事定期组织积极分子交流会,了解各岗位工作的情况及感想,并对培养人反馈积极分子的工作情况。

由于专业教研室和实验室是学生进行学习、自我教育、自我管理的重要阵地,这种积极分子考察培养模式有利于扩大党建工作的覆盖面,提高培养效力。在专业教研室和实验室,有业务能力和党建思想过硬的党员教师的存在,就可以凝聚同一专业的教师和学生,形成相对集中和相互熟悉的沟通交流模式。另一方面,学生党员数量逐年减少,入党积极分子就应当发挥自身的优势,积极分子囊括各个年级各个班级,有利于学生的互相学习和模范带头作用的发挥。每个办公室、教研室、实验室都有党员教师,安排入党积极分子进入不同科室承担实践岗位,既可以使学生得到锻炼,又便于党员教师全方位的对其进行教育考察培养,增强了培养考察的力度和有效性。

通过这种方式,使入党积极分子和岗位负责老师(党员老师)都能够利用这一平台提高党性修养、增强责任意识,服务他人、服务社会、坚定信念、敬业奉献。

培养考察情况篇5

【摘要】目的:建立大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细菌生物膜(bbf)的模型,考察注射用双黄连对bbf形成的影响及抑制作用。方法:在特定的条件、方法下分别对细菌单独培养和细菌与提取物共同培养,通过酶标仪测量其od值来考察bbf的生长能力。结果:注射用双黄连对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌bdf的形成均有抑制作用。

【关键词】双黄连;细菌生物膜;影响

建立大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细菌生物膜(bbf)的模型,考察注射用双黄连对bbf形成的影响及抑制作用。

1bbf模型的建立

1.1大肠杆菌bbf模型的建立1.1.1菌种的复活将大肠杆菌冻干粉加入0.4mlnb培养基溶解后,放入37℃恒温振荡器(230~240转/分钟)中培养8小时,分装在离心管中,加入0.5ml的50%甘油,置于液氮中,于-80℃冰箱中冷藏保存。

1.1.2大肠杆菌bbf模型建立的方法将置于-80℃冰箱中的大肠杆菌划线于nb培养基的平板上,置于恒温培养箱中,于36℃培养24小时。挑取平板上的单一菌落溶于5mlnb液体培养基中,于36℃恒温振荡器中振荡8小时,得到单克隆细菌增殖培养的菌液,备用。

将菌液稀释100倍置于96孔板中,四周为nb培养基作为空白。置于恒温培养箱中,于36℃培养24小时,取出。将菌液倾出,用蒸馏水反复清洗后,加入0.1%结晶紫染色30分钟后,将结晶紫倾出,洗净,加入1%脱氧胆酸钠溶液,30分钟后,测其600nm处的od值。以菌液浓度为横坐标,以od值为纵坐标,考察bbf生长情况。

1.2影响大肠杆菌bbf生长的因素通过实验的反复摸索,我们发现影响大肠杆菌bbf生长的因素主要有以下几种:①菌种:不同的大肠杆菌菌株对bbf的影响很大,直接影响到bbf的生长与否和bbf形成的好坏。且大肠杆菌传代越多,bbf的生长情况越不好,故我们每次实验均采用大肠杆菌的第二代菌株。

②96孔板的材质:不同的细菌在不同材质的96孔板上的生长情况是不同的。我们选用了市场上常见的三种96孔板分别是进口聚氯乙烯(pvc)板,国产聚苯乙烯(ps)板,进口聚苯乙烯板,大肠杆菌分别在不同材质的96孔板上培养。结果,大肠杆菌在国产ps板上的生长情况是最好的。

③培养时间:考虑到实验操作时间的可行性,我们选定将大肠杆菌分别培养18小时、24小时、36小时,考察bbf的生长情况。结果,大肠杆菌在培养24小时后,bbf的生长情况最好。

1.3金黄色葡萄球菌bbf的建立及影响因素金黄色葡萄球菌的bbf模型的建立方法基本上与大肠杆菌的相同。在这里就不做详细的介绍。我们仍旧分别考察了96孔板的材质、培养时间及菌液浓度等因素,最终确定金黄色葡萄球菌菌液稀释100倍、于国产ps板上培养24小时,bbf的生长的最好且稳定。

2注射用双黄连对bbf的影响2.1培养方法的建立我们建立两种方法分别考察药物对bbf形成的影响及对bbf的抑制作用。96孔板的点样方法1:四周为菌液(nb培养基)。b行加入180μl菌液(nb培养基),c~g行每孔各加入100μl菌液(nb培养基),b行每孔用移液枪加入20μl药液,混匀,用多通道移液枪从b行吸出100μl移入c行,混匀,再从c行吸出100μl移入d行,依此类推至h行,吸出100μl后,弃去。即从b~h行药液浓度以2倍递减。96孔板的点样方法2:四周为菌液。b~g行加入100μlnb培养基,b行每孔用移液枪加入100μl药液,混匀,用多通道移液枪从b行吸出100μl移入c行,混匀,再从c行吸出100μl移入d行,依此类推至h行,吸出100μl后,弃去。即从b~h行药液浓度以2倍递减。

培养方法一:考察对bbf形成的影响。

按“96孔板点样方法1”完成后,依照“大肠杆菌bbf模型建立的方法”中置于恒温培养箱中,于36℃培养24小时,以药液浓度为横座标,以平均od值为纵坐标,作图,考察对bbf形成的影响。

培养方法二:考察对bbf的抑制作用我们先将96孔板全部点菌液,依照“大肠杆菌bbf模型建立的方法”置于恒温培养箱中,于36℃培养24小时,取出,此时bbf已经形成,将菌液倾出,按“96孔板点样方法”,将培养基培养24小时,以药液浓度为横座标,以平均od值为纵坐标,考察对bbf的抑制作用。

2.2考察对bbf形成的影响

图1注射用双黄连对大肠杆菌bbf形成的影响

将注射用双黄连加水溶解,配制成5mg/ml的药液,分别进行对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌培养的操作。注射用双黄连对大肠杆菌bbf形成的影响结果见图1所示。

3讨论

1)通过实验摸索,建立了可靠而稳定的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细菌生物膜(bbf)的模型,确定了影响因素。

2)96孔板清洗方法的摸索:96孔板的材质是bbf模型能够成功建立的重要因素,确定96孔板的清洗方法:先在96孔板内加注洗液,浸泡3~5分钟后,用手握持96孔板,甩干孔内液体;再用乙醇浸泡24小时后超声20分钟,自然晾干,即可。

3)考察了注射用双黄连对bbf形成的影响。得出注射用双黄连对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌bbf的形成均有明显的抑制作用。

4结语

本实验建立了可靠而稳定的bbf模型,并通过此模型考察了中药注射用双黄连对bbf形成的影响,筛选出能够抑制或破坏bbf形成的活性成分,为从中药中开发治疗慢性感染性疾病的新药提供新的筛选模型,为科学、客观评价中医药在治疗慢性感染方面的作用提供了新的方法。

参考文献

[1]bavert,etal.biofilmformationinendotrachealtubes:as-sociationbetweenpneumoniaandthepersistenceofpathogents.

monaldiarchchestdis,2002,(57):84.